课程名称：发酵工程综合实践

教师所属教学院部：生物工程学院 教师姓名：马丹

一、 教材、参考书及网络教学资源

1. 教材：自编实验指导书

2. 参考书：陈军.发酵工程实验指导[M].北京：科学出版社.2013年.

吴根福.发酵工程实验指导(第2版) [M].北京：高等教育出版社.2013年.

3．网络教学资源（课程网址）：无

二、重点难点章节及重点难点基本内容

1．产淀粉酶菌株的筛选

（1）筛选培养基的配置

（2）碘液的配置

（3）土样的采集

（4）富集培养

（5）初步筛选

（6）分离纯化

2．紫外诱变技术及抗药性突变菌株的筛选

（1）出发菌株菌悬液的制备

（2）紫外诱变

（3）链霉素抗性突变株的筛选

3．毛霉的分离和豆腐乳的制备

（1）重点：毛霉的分离，显微镜检，培养与晾花，装瓶与压坯。

（2）难点：培养与晾花，装瓶与压坯。

4.柠檬酸的发酵、分析、测定及提取

（1）菌种活化与种子的制备

（2）接种与发酵

（3）发酵液预处理

（4）发酵产物的检验与分析

（5）柠檬酸含量的初步测定

（6）柠檬酸的粗提

5. 产酶微生物的筛选及鉴定

（1）设计筛选产酶微生物及其鉴定的实验方案

（2）产酶微生物的筛选（平板初筛、摇瓶复筛）

（3）25升发酵罐的发酵实验

（4）产酶微生物的鉴定

重点：设计产酶微生物及其鉴定的实验方案，产酶微生物的筛选（平板初筛、摇瓶复筛），发酵实验，产酶微生物的鉴定。

难点：设计产酶微生物及其鉴定的实验方案，产酶微生物的筛选（平板初筛、摇瓶复筛）。

三、导读基本要求

1、学生自学笔记要求：详细写明实验原理和方法，分析过程。

2.辅导答疑安排：12月每周一上午9:30，地点A2208。

四、作业题

实验一：

1.在观察结果的过程中为什么要及时观察，否则会有什么的后果。

2.为什么同样一个土样要稀释几个不同梯度进行涂平板。

实验二：

1．为什么在诱变前要把菌悬液打散?

2．试述紫外线诱变的注意事项。

3．简述后培养的目的及注意事项。

实验三：

实验过程中应该注意哪些问题？

实验四：

1．从黑曲霉活化至最后进入摇瓶发酵，中间可否省略发酵种子扩大培养这一步？为什么？

2．影响柠檬酸提取效率的因素有哪些？

实验五：

产酶微生物筛选时需要注意哪些问题？